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PCR仪2D 梯度功能温度优化
发布时间:2020-09-22
世界著名的 MPI CBG(Max Planck Institute of Molecular Cell Biology and Genetics)的科学家,在使用了 Eppendorf Mastercycler® X50 的 2D 梯度功能后表示,使用 2D 梯度可以非常方便地在一次实验中对 PCR 反应过程中的两个温度步骤进行优化(如,变性与退火),一次可以摸索 96 个不同的温度条件组合。
这样的条件优化对于难以扩增的高 GC 含量的模板的条件优化显得尤为重要。而这使得 PCR 条件优化的过程有了全新的可能性。实验证明条件优化的更多可能性,实验测试了用 X50 的 2D 梯度功能摸索优化小鼠基因 PCR 扩增条件来提高产量的方法。
科学家没有采用 96 孔板满板 PCR 的方法来进行扩增,而是非常机智地,在尽可能少的实验量的情况下覆盖到所有的温度组合。
从实验结果来看:
采用 91 度左右的温度来进行变性反应时的核酸产物较多,虽然我们一般变性温度会使用 94-95 度,但是这次实验很显而易见地表明,结果和我们的传统认识还是有所区别的,而这个情况在不具备 2D 功能的 PCR 仪上操作时几乎不会被关注到。
今年新冠肺炎高发,PCR仪是检测核算的重要工具之一,如果单位须有采购PCR仪的需求,可选择罗氏荧光定量PCR仪。
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